Os antíxenos de proteínas recombinantes adoitan ter varios epítopos diferentes, algúns dos cales son epítopos de secuencia e outros son epítopos estruturais.Os anticorpos policlonais obtidos mediante a inmunización de animais con antíxenos desnaturalizados son mesturas de anticorpos específicos de epítopos individuais e pódense utilizar en xeral para detectar estruturas naturais ou proteínas diana desnaturalizadas.Un beneficio secundario do uso de proteínas desnaturalizadas como inmunóxenos é que as proteínas desnaturalizadas tenden a ser máis inmunoxénicas e poden estimular unha forte resposta inmune nos animais.
O sistema de expresión de Escherichia coli adoita escollerse con fins antixénicos porque é o sistema máis custoso en termos de tempo e diñeiro.Para mellorar a posibilidade de expresión da proteína diana e a conveniencia da purificación, ás veces só se expresa un pequeno fragmento da proteína diana, como un dominio específico.
A estrutura tridimensional das proteínas
O dominio específico dunha proteína
Se o propósito da preparación de anticorpos é unicamente para a detección de wb, é económico e rápido utilizar un pequeno péptido sintético como antíxeno, pero existe o risco de inmunoxenicidade débil ou non rexenicidade debido á selección inadecuada do segmento peptídico.Dado que a preparación de anticorpos require un longo período, adoitan seleccionarse dous ou tres segmentos peptídicos diferentes para preparar anticorpos utilizando antíxeno polipeptídico para garantir a taxa de éxito do experimento.
É necesario que a pureza do antíxeno polipeptídico para a inmunización sexa superior ao 80%.Aínda que unha pureza maior pode obter teoricamente anticorpos con mellor especificidade, na práctica, os animais sempre producen un gran número de anticorpos inespecíficos, enmascarando así os beneficios da pureza do antíxeno.
Ademais, a preparación de anticorpos a partir de pequenos péptidos debe estar entrecruzada co antíxeno portador axeitado para mellorar a súa inmunoxenicidade.Dous portadores antixénicos comúns son KLH e BSA.
Hora de publicación: 23-mar-2023